медицинский каталог




Медицинская паразитология

Автор Генис Д.Е

результаты получают при слегка щелочной реакции

(рН 7,1-7,2).

При нормальной окраске получают мазки светло-сиреневого цвета, эритроциты розовые с легким фиолетовым оттенком. Цитоплазма эозинофилов нежно-голубого цвета, зернистость — ярко-розовая. Цитоплазма лимфоцитов голубая, ядра вишнево-красные. Цитоплазма нейтрофилов бледно-розовая с обильной мелкой фиолетовой зернистостью.

При кислой реакции воды (рН ниже 7,0) препарат долго не прокрашивается, приобретает ярко-розовый цвет. Ядра паразитов и лейкоцитов окрашиваются слабо, зернистость пораженных эритроцитов не видна.

При сильно щелочной реакции воды (рН 7,3 и выше) мазок серовато-зеленого или голубого цвета, эритроциты, ядра и цитоплазма клеток окрашивается в синий цвет. Обнаружить и определить плазмодии в таких препаратах очень трудно.

Для определения реакции 5 мл испытуемой воды наливают в пробирку и добавляют 2—3 капли 10 % спиртового раствора гематоксилина. Если вода приобретает слабофиолетовый цвет через 2 мин, то она пригодна для разведения краски. Если появится сразу красно-фиолетовый цвет, то вода имеет щелочную реакцию (выше рН 7,2). При кислой реакции вода цвет не изменяет или слегка желтеет.

С целью получения нужной реакции к щелочной воде добавляют по каплям 1 % раствор уксусной кислоты, а к кислой — 1 % раствор бикарбоната натрия. При этом следует каждый раз проверять рН воды с помощью прибора «рН-метр», индикаторной бумаги или раствора гематоксилина, чтобы не передозировать добавляемые растворы кислоты или бикарбоната.

Лучше всего краску разводить фосфатным буферным раствором с рН 7,0, приготовленного по рецепту:

Калия монофосфат безводный КН2РО4 Натрия дифосфат безводный Na2HP04 или натрня фосфат кристаллический Na2HP04-12 Н20 Вода

1,5 г 3 г

7,5 г 1 л

Если неизвестно, какая взята соль натрия фосфата — безводная или кристаллическая, то ее просушивают в термостате при температуре 37 °С 5 сут, а затем разводят из расчета 3,75 г на 1 л воды.

Рабочий водный раствор краски можно хранить 2—3 ч.

9.3.

ОКРАСКА ТОЛСТОЙ КАПЛИ КРОВИ

Чем выше температура в помещении, тем быстрее окрашивается препарат, и наоборот. В среднем мазок окрашивается в течение 45—50 мин, толстая капля — 15—30 мин.

Если толстые капли сохранялись более недели неокрашенными, что само по себе действует как слабая фиксация, особенно в условиях жаркого климата, то препараты после окраски могут получиться недостаточно прозрачными из-за неполного гемолиза эритроцитов.

В таких случаях предварительно следует налить на препарат несколько капель дистиллированной воды. Через 10—15 мин гемоглобин эритроцитов переходит в воду, придавая ей буроватый оттенок, а толстая капля становится белесоватой. Воду сливают, каплю осторожно прополаскивают дистиллированной водой и затем наливают краску.

Можно окраску проводить и в специальных контейнерах, в которых стекла расположены на ребре, а выпадающая в осадок краска не портит препарат. Однако при этом возрастает риск смывания толстой капли со стекла.

Правильно окрашенная толстая капля имеет фиолетовый цвет, перекрашенная — темно-фиолетовый, недокрашенная — светло-голубой. Длительно хранившаяся при высокой температуре или зафиксированная толстая капля приобретает почти черный цвет.

Лабораторная работа № 2.

Техника окраски толстой капли крови

Оборудование: плоская ванночка или кювета; подставки для окраски и сушка стекол; иипеткн; краска Романовского; дистиллированная вода или фосфатный буферный раствор; иммерсионное масло; вата; эфир; препараты крови для окрашивания; микроскоп.

Методика работы. 1. Предметные стекла с сухими толстыми каплями крови положить на подставку над кюветой препаратами кверху. Стекла не должны соприкасаться.

2. В стакан- налить дистиллированную воду или, лучше, фосфатный буферный раствор и добавить пипеткой краску Романовского из расчета 1 каплю на 1 мл воды.

3. Пипеткой нанести разведенный рабочий раствор краски так, чтобы она полностью покрыла препараты без образования пузырьков.

4. Оставить краску на препаратах на 30 мин, следя за тем, чтобы краска не стекла с препаратов, добавляя ее при необходимости пипеткой.

5. По окончании процедуры каждое стекло, не сливая с него краски, осторожно промыть слабой струей воды, например из стакана (сильная струя воды может смыть толстую каплю), до тех пор, пока промывная вода не станет бесцветной.

Примечание. Если сначала слить краску, а затем промывать, то образовавшаяся пленка краски может испортить препарат или послужить причиной диагностической ошибки.

6. Предметные стекла поместить в подставку для просушки в

вертикальном или наклонном положении, предохраняя от попадания пыли и солнечных лучей.

. 7. После просушивания препараты исследовать под микрокопом с масляной иммерсией. Оценить качество толстой капли и ее окраски.

8. Совместно с преподавателем провести микроскопию готовых препаратов малярийных плазмодиев в мазке и толстой капле крови.

9.4. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЫДЕЛЕНИЙ

МОЧЕПОЛОВЫХ ПУТЕЙ

Выделения мочеполовых путей исследу

страница 52
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91

Скачать книгу "Медицинская паразитология" (3.87Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(24.06.2018)