медицинский каталог




Кожные и венерические болезни. Руководство для врачей. Том 4

Автор Ю.К.Скрипкин (ред.)

500 000 ЕД (2500 ЕД/мл).

Среду тщательно перемешивают, устанавливают рН 6,0±0,2 и без промедления разливают в стерильные чашки Петри одноразового пользования (6x50) по 1 —1,5 мл. Чашки после затвердения агара оставляют на рабочем месте в боксе в перевернутом положении на ночь. Для предупреждения потерь влаги чашки хранят завернутыми в целлофановых пакетах при 4°С (в перевернутом положении).

При субкультивации уреаплазм на плотной среде рост колоний наблюдают через 48—72 ч и на 5-е сутки. Чашки помещают в увлажненный, герметически закрытый эксикатор с зажженной свечой, что позволяет получить повышенное содержание СО2, и инкубируют при температуре 37 °С в перевернутом положении.

Техника субкультивирования. После изменения цвета жидкой среды (начало роста культур) на поверхность плотной среды стерильной пастеровской пипеткой наносят 1 каплю со дна пробирки, чашку с посеянным материалом инкубируют, как описано ранее.

Предварительно плотную среду подсушивают в термостате не более 20 мин. Если плотная среда содержит индикатор Кларка без буфера, то рост колоний характеризуется изменением цвета среды. Если среда содержит индикатор сульфат марганца, то колонии уреаплазм окрашиваются в коричневый или золотисто-желтый цвет. Чашки просматривают в световом микроскопе при малом увеличении — соответственно 250 или 200 при прямом прохождении света. Можно нарезать хирургическим скальпелем агаровые блоки на пластинки размером 1 см2, перенести их на предметное стекло; поверхность агара с колониями устанавливают сверху, добавляют каплю краски Дейнеса (или без окраски), на поверхность пластинок накладывают покровное стекло, фирксируют края стекла парафином и просматривают при увеличении 400.

Колонии уреаплазм размером 20—50 мкм наблюдаются при росте только центральной зоны, видны углубления в центре, края колонии зубчатые, поверхность сморщенная, они погружаются целиком в агар и покрыты тонким слоем агара. При росте периферической зоны в виде тонкого слоя размер колонии увеличивается до 100 мкм и более. Колонии М. hominis отличаются морфологически и остаются бесцветными.

При непосредственном внесении патологического материала асептически на плотную среду колонии уреаплазм после инкубации в большинстве случаев отличаются от описанных. В этом случае мочевые нити, содержащие колонии уреаплазм, в результате окраски двуокисью марганца имеют темно-коричневый, а иногда и черный цвет; такая же окраска и у эпителиальных клеток. Если на эпителиальных клетках имеется несколько колоний уреаплазм, то колонии выглядят в виде округлых образований, расположенных неправильными кольцевидными фигурами с ярким окрашенным центром без периферических зон. Рост колоний в этом случае происходит лучше при 20% содержании СОг. Выращивают в термостате при температуре 36 °С.

Среда для выделения Ur. urealyticum может быть приготовлена из ингредиентов отечественного производства в любом практическом учреждении медицинского профиля.

Серологическая идентификация

1. Реакция агглютинации. Для приготовления антигенов микоплаз-мы выращивают в жидкой питательной среде в течение 3—4 дней. Бульонные культуры осаждают при 6000 оборотов в минуту в течение 50 мин и однократно промывают 1,5% раствором NaCl при том же режиме центрифугирования. Взвесь микоплазм в 1,5% растворе NaCl гомогенизируют в гомогенизаторе и доводят до густоты 500 млн/мл (по оптическому бактерийному стандарту мутности). Сыворотки разводят двукратно 1,5% раствором NaCl. Реакцию ставят в объеме 0,4 мл. Результаты учитывают через 2 ч инкубации при температуре 37 °С и через 24 ч инкубации при комнатной температуре. За титр реакции принимают то разведение сыворотки, при котором наблюдаемый в агглютиноскопе агглютинат оценивался как ++.

2. Реакция связывания комплемента (РСК). Эта реакция ставится в микромодификации на плексигласовых досках. РСК позволяет полуколичественно определить комплексы антиген — антитело, связывающие комплемент. Если в данной системе содержится ограниченное количество комплемента, то образовавшиеся иммунные комплексы его полностью или частично связывают. Потеря комплемента пропорциональна количеству образовавшихся комплексов. Индикатором связывания комплемента служат эритроциты, сенсибилизированные гемолизином. Комплемент, оставшийся несвязанным, вызывает гемолиз (отрицательная реакция). При фиксации всего комплемента комплексами антиген — антитело гемолиз отсутствует (положительная реакция).

Нативная суспензия микоплазм представляет собой комплемент-фиксирующий антиген. Для его приготовления микоплазмы выращивают в бульоне при температуре 37 °С в течение 4—5 дней, затем центрифугируют и осадок 3 раза промывают изотоническим раствором хлорида натрия при том же режиме центрифугирования для удаления примесей питательной среды. Затем антиген обрабатывают комплементом, для чего к 1 мл антигена добавляют 1 каплю неразведенного комплемента. Смесь помещают на 2 ч при температуре 37 °С, затем на 15—18 ч при 4 °С, после чего прогревают при температуре 56 °С в течение 30 мин.

Исследуемые сыворотки разводят в соотношении 1:6, инактиви-руют на водяной бане при температуре 60 °С в течение 30 мин — разведение увеличивается до 1:8. Определение рабочей дозы комплемента: во все лунки досок закапывают буферный раствор, в часть лунок вносят разведенный антиген, во все остальные — разведения сывороток и, наконец, во все лунки — комплемент в разведении 1:20, 1:25, 1:30, 1:35, 1:40, 1:50, 1:60, 1:70, 1:80 и 1:100. После инкубирования смесей при температуре 4 °С в течение 18—20 ч добавляют гемолитическую систему и доски помещают в термостат при температуре 37 °С на IV2 ч при периодическом встряхивании. Затем учитываются результаты реакции, которые оценивают в крестах по следующей схеме: полная задержка гемолиза (++++); слегка гемолизированные эритроциты (+++); гемолиз половины эритроцитов (++); гемолиз более половины эритроцитов (+); полный гемолиз (-).

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ХЛАМИДИОЗА И УРЕАПЛАЗМОЗА

Клиническая картина заболеваний мочеполовых органов, вызванная уреаплазмами и хламидиями, во многом напоминает течение гонококковой инфекции. От последней отличается главным образом меньшей остротой воспаления, большей частотой осложнений и упорством по отношению к терапии противогонорейными препаратами.

Следует различать такие понятия, как «мйкоплазмоносительство» или «уреаплазмоносительство» и уреаплазмоз — заболевание. Ми-коплазмо- и уреаплазмоносительство наблюдается у практически здоровых лиц, не имеющих никаких воспалительных заболеваний мочеполовых органов как в анамнезе, так и на момент обследования, сохранивших полноценную генеративную функцию, имеющих не-отягощенный акушерский анамнез, здоровое потомство. При обследовании не выявляется каких-либо патологических изменений в мочеполовом тракте, определяется нормальное содержание лейкоцитов в мазках из уретры, влагалища, канала шейки матки, прямой кишки с присутствием обычной палочковой флоры. Микоплазмы высеваются чаще из одной локализации (влагалище).

При заболевании уреаплазмозом или микоплазмозом наблюдаются различной степени и тяжести воспалительные процессы моscanned by К. А. А.

252

чеполового тракта (субклинические или манифестно протекающие), могут быть нарушения генеративной функции, отягощенный аку-шерско-гинекологический анамнез в прошлом или в период обследования.

В связи с малым отличием клинической картины уреаплазменной инфекции от торпидно протекающей и хронической гонореи особое значение приобретает постановка этиологического диагноза, т. е. обнаружение возбудителя болезни.

Инкубационный период при хламидиозе составляет 20—30 дней, при инфекциях, обусловленных уреаплазмами и микоплазмами, — 19 дней.

У женщин инфекция чаще протекает скрыто и выявляется лишь при тщательном обследовании по поводу негонококкового уретрита у полового партнера. При длительно существующем процессе возможны поражение шейки матки, уретры, протоков больших вестибулярных желез, маточных труб, прямой кишки и возникновение перигепатита. На развитие диссеминированной формы могут оказывать влияние применение гормональных противозачаточных средств, стадия беременности (последняя треть) и сопутствующие инфекции.

Клинические симптомы генитального хламидиоза женщин неотчетливы: беспокоят боли внизу живота, парестезии и выделения из влагалища, а приблизительно у 2/з инфицированных заболевание протекает бессимптомно. При поражении уретры больные жалуются на периодические дизурические расстройства, учащенное болезненное мочеиспускание, могут возникать цисталгии, т. е. развивается «уретральный синдром». Однако воспалительный процесс в уретре редко бывает изолированным, обычно ему сопутствует цервицит или эрозия шейки матки.

Хламидийные цервициты диагностируют в 22—42% случаев: у 10—37% лиц, посещающих венерологическую клинику, и у 5— 19% — гинекологическую.

Сальпингит — тяжело протекающее заболевание, неблагоприятным исходом которого является непроходимость маточных труб, что часто приводит к бесплодию и повышает риск в отношении возникновения внематочной беременности. При обследовании женщин, страдающих острым сальпингитом, хламидийная инфекция диагностируется в 24% случаев. Микроорганизмы обнаруживаются внутри канала шейки матки, в соскобах с эндометрия и маточных труб и при лапароскопии. Одним из грозных осложнений сальпингитов является развитие перигепатита. Предполагают, что данное осложнение может быть обусловлено хламидийной инфекцией, так как в этом случае обнаруживают признаки активного хламидиоза при серологических исследованиях, а также выявляют хламидии куль-турально из материала канала шейки матки.

Процент выделения хламидии возрастает при наличии клинических проявлений и субъективных жалоб. Так, хламидии выделяли у 29% женщин без каких-либо проявлений и у 84% при слизисто-гнойных выделениях из канала шейки матки. При наличии гипертрофических эрозий хламидии обнаруживаются у 87%, без них — второе реже, у 31%.

Хламидии вызывают не только гипертрофию слизистой оболочки шейки матки, но могут обусловить развитие ф

страница 49
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73

Скачать книгу "Кожные и венерические болезни. Руководство для врачей. Том 4" (5.06Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(14.08.2018)