медицинский каталог




Клиническая биохимия

Автор А.Я. Цыганенко, В.И. Жуков, В.В. Мясоедов, И.В. Завгородний

клетки влияют на рядом расположенные клетки.

• Аутокринная сигнализация. Клетки отвечают на вещества, вырабатываемые этими же клетками.

Генетические болезни

Существует три основные категории генетических заболеваний.

1. Хромосомные аномалии. Хромосомные нарушения вызываются утратой, избытком или нарушениями в строении хромосом. Примером аутосомного хромосомного нарушения является синдром Дауна (трисомия по 21ой хромосоме). Синдром КлаЙнфельтера (47, XXY) — пример заболевания, связанного с половыми хромосомами.

2. Полигенные нарушения. Полигенные нарушения вызываются взаимодействием многих генов с факторами внешней среды. Генетические факторы важны при многих распространенных заболеваниях, в том числе ИБС, гипертензии и сахарном диабете.

Например, гетерогенной является этиология ИБС. В то время, как небольшое число случаев заболевания вызывается простым генным дефектом (например семейная гиперхолестеринемия), у большинства пациентов заболевание полиэтиологично. Факторы, приводящие к заболеванию, взаимодействуют между собой. Каждый фактор в отдельности малоинтенсивен, но кумулятивное их действие может приводить к заболеванию.

Примером мультифакторного состояния может быть полигенная гиперхолестеринемия, при которой изменения в белках, регулирующих метаболизм липопротеинов (включая аполипопротеины апоВ и апоЕ), ферментах и рецепторах приводят к повышению уровней холестерина.

3. Моногенные нарушения. Моногенные нарушения вызываются

дефектом одиночного гена и развиваются по простой картине

наследования (Менделя). Многие наследственные метаболические заболевания, являющиеся результатом одиночного генного

дефекта, имеют метаболическую основу и до 8% детей, находящихся в клиниках, страдают одним из таких нарушений.

ДНК-ДИАГНОСТИКА

Молекулярная генетика — это отрасль, методы которой нашли широкое применение во многих дисциплинах. Предметом молекулярной генетики является изучение экспрессии и наследования генов на молекулярном уровне. В клинической биохимии это заключается в изучении различий в последовательности основных пар в ДНК. Анализ ДНК пациентов и генов, которые в них содержатся, может давать важную диагностическую информацию.

Мутации в одиночных генах могут вызывать наследственные заболевания, такие как муковисцидоз, серповидноклеточную анемию, семейную* гиперхолестеринемию и мышечную дистрофию Дюшена. Сложные нарушения, затрагивающие несколько генов, могут лежать в основе таких частых заболеваний, как ИБС, сахарный диабет, рак.

Перенос на нейлоновую мембрану

Меченые образцы ДНК Связываются с комплементарными последовательностями

Детекция, например ауторадиографией, показывающей фрагменты ДНК, которые содержат интересующие j последовательности

4й?

Рис. 189. Саутерн блот анализ ДНК человека

зованию фрагментов ДНК различной длины после действия ферментов.

ДНК-фрагменты разделяются электрофоретичес-ки, переносятся на нейлоновые мембраны и гибридизи-руются с образцами ДНК, меченными радиоактивно или оптически активными маркерами. Этот метод получил название Саутерн блот анализ {owe. 189).

Саутерн блот метод применяется для идентификации определенных последовательностей нуклеотидов в ДНК. Этим методом могут быть установлены мутации типа делеций и вставок, а также мутации, изменяющие места распознавания для ре-стрикционного фермента.

Метод, кроме того, используется для определения наличия специфической перестройки генов внутри или между хромосомами, как это происходит в клонах злокачественных клеток.

(а) Полиморфные ДНК-последовательности могут использоваться как

ДНК-маркеры

(б) Во время мейоза происходит пересечение хроматид и ДНК-последовательности перекрещиваются

(в) Маркеры, близко расположенные к интересующему гену, остаются

связанными, тогда как дистантно расположенные маркеры при

разделении хромосом остаются несвязанными

Связывание

При немногих заболеваниях, например серповидноклеточной анемии, мутация, вызывающая заболевание, происходит в сайте, узнаваемом рестриктивным ферментом. Диагностика при этом проводится с помощью ПДОФ-анализа. Однако чаще рестрикционные сайты не являются местами мутаций. Вместе с тем полиморфизм в рест-риктивном сайте, прилегающем к клинически важному сайту мутации

Рис. 191. Полимеразная цепная реакция

так, что эти два сайта остаются связанными во время мейотической рекомбинации, позволяет эффективно использовать ПДОФ-анализ для диагностики (рис. 190).

ВЧТП-полиморфизм

ПДОФ-анализ имеет ограничения, связанные с тем, что каждый человек обладает двумя копиями определенного участка ДНК (по одному от каждого родителя).

Другой имеющий мвсто тип полиморфизма сайтов носит название вариабельного числа тандемного повтора (ВЧТП). Рестрик-тивные сайты ограничивают с флангов регион генома, длина которого варьирует у индивидуумов, что обусловлено различным числом копий специфической последовательности («тандемный повтор»). Картина рестриктивных фрагментов, определяемых в пробах, уже полностью уникальна для индивидуум

страница 150
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163

Скачать книгу "Клиническая биохимия" (4.44Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [обратная связь]


Химический каталог Rambler's Top100

Copyright © 2009
(20.08.2018)